甲基对硫磷单克隆抗体的研制及鉴定

目的　研制甲基对硫磷 (M160 5 )单克隆抗体 (McAb)。方法　人工抗原M160 5 TTH免疫BALB/C小鼠 ,用被免疫的脾脏淋巴细胞与骨髓瘤细胞SP2 / 0在融合剂PEG40 0 0 作用下融合。经过HAT培养液选择性培养、间接ELISA法筛选和有限稀释克隆后 ,鉴定该杂交瘤细胞株和McAb。结果　获得 2株稳定分泌McAb的杂交瘤细胞株G12、H0 2 ,其培养液和腹水滴度为 1∶10 3和 1∶10 5。进一步研究G12发现 ,该杂交瘤细胞株的染色体数为 99～ 10 8,其McAb分类为IgM ,该McAb的亲和力常数为 1.67× 10 5L/mol,且具有较好的特异性。结论　获得抗M160 5的特异性McAb ,为建立M160 5简便、快速、特异的生物检测方法提供了必要条件。