产单核细胞李斯特菌溶血素O基因在大肠杆菌中的优化表达及ELISA检测方法的建立

被引:3
作者
赵松波 [1 ,2 ]
孙晓林 [2 ]
张少华 [1 ]
周邦信 [1 ,2 ]
窦永喜 [1 ]
骆学农 [1 ]
机构
[1] 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室
[2] 甘肃农业大学动物医学院
关键词
产单核细胞李斯特菌; 李斯特菌溶血素O; 优化表达; 纯化; 酶联免疫吸附试验;
D O I
10.16656/j.issn.1673-4696.2009.11.007
中图分类号
S852.61 [病原细菌];
学科分类号
090601 ;
摘要
在克隆产单核细胞李斯特菌(LMO)hlyA基因并构建其原核表达载体的基础上,进一步对IPTG浓度、诱导时间、诱导温度等影响目的蛋白表达的重要条件进行了优化。根据确定的最佳诱导条件,使目的蛋白获得了高效表达。对表达的李斯特菌溶血素O(LLO)进行了纯化,以其作为靶抗原,采用间接ELISA方法检测了动物血清中的特异性LLO抗体。结果表明,用表达产物作为靶抗原可对LMO感染动物进行初步诊断,为建立基于LLO的动物李斯特菌病血清学诊断技术奠定了基础。
引用
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