人骨髓间充质干细胞的扩增培养及向成软骨样细胞的定向诱导分化

被引：11

作者：

邱丽燕

王金福

沈丹

金洁

机构：

[1] 浙江大学生命科学学院,浙江大学生命科学学院,浙江大学附属第一医院,浙江大学附属第一医院浙江杭州,浙江杭州,浙江杭州,浙江杭州

来源：

浙江大学学报(理学版) | 2004年 / 03期

关键词：

骨髓间充质干细胞; 扩增; 成软骨样细胞;

D O I：

暂无

中图分类号：

R329.28 [];

学科分类号：

摘要：

从人骨髓中分离和培养间充质干细胞(MSCs),在原代和传代培养中其形态学上均为贴壁、纤维状的细胞,随着代次的增加细胞形态更加趋于一致.流式细胞仪鉴定CD45、CD34、CD117、HLA-DR阴性,CD29、CD166阳性,并随着培养代次的增加,阳性比率和阴性比率出现相应的上升和降低,说明细胞中MSCs纯度增加.第三代细胞大约有80%处于G0/G1期,S+G2+M期约20%,说明MSCs有强大的增殖潜能.在传代培养中的最适接种密度为5000个/cm2左右.MSCs在体外经历了滞缓期、对数生长期、平稳期3个时期,传代培养的MSCs生长速度比原代的MSCs明显快很多.采用程序降温法对MSCs进行冻存,60～90d后对冻存的MSCs进行复苏,发现MSCs仍可在体外良好生长4～6代,特定的MSCs样本可以扩增10代,说明经过冻存的细胞仍具有良好的增殖能力.对4例标本的前三代MSCs在体外利用TGF-β1和维生素C诱导两周后,用RT-PCR证明MSCs表达软骨特异性的II型前胶原的mRNA,说明培养的细胞具有向成软骨样细胞分化的潜能,由此进一步证实其为MSCs.

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页码：337 / 342

页数：6

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