利用限制性内切酶诱导整合(REMI)获得稻瘟病菌突变体

被引：16

作者：

刘树俊

有江力

山口勇

机构：

[1] 中国科学院遗传所植物细胞与染色体工程国家重点实验室,日本理化学研究所微生物制御研究室

来源：

遗传学报 | 1998年 / 03期

关键词：

限制性内切酶诱导整合，稻瘟病菌，分生孢子，致病性，电子扫描，显微镜;

D O I：

暂无

中图分类号：

Q78 [基因工程（遗传工程）]; S432.44 [];

学科分类号：

071007 [遗传学];

摘要：

限制性内切酶诱导整合（ＲｅｓｔｒｉｃｔｉｏｎＥｎｚｙｍｅ－ｍｅｄｉａｔｅｄＩｎｔｅｇｒａｔｉｏｎ，简称ＲＥＭＩ，下同）已被成功用于创造随机插入突变和提高转化频率。用限制酶消化的线状质粒ｐＣＳＮ４３或ｐＢＦ１０１，并加一定量的同种限制酶，转化稻瘟病菌（Ｍ．ｇｒｉｓｅａ）的原生质体后，得到约４５０个转化子。对一些表型进行测试后，获得两个分生孢子形态突变体。与野生型相比较，突变体的分生孢子细而且长，呈棒形。ＲＥＭＩ非常有用，因其能提高转化频率，较容易地获得期望数目的转化子；限制性内切酶可随机切割寄主染色体，便于插入线状质粒，导致基因突变。可根据异常表型判定基因的功能，根据插入质粒克隆该基因。

引用

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