蜡样芽孢杆菌ERIC-PCR分子分型方法的建立

被引：8

作者：

王君 ^{[1
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吴清平 ^{[2
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吴克刚 ^{[1
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陈谋通 ^{[2
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张菊梅 ^{[2
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郭伟鹏 ^{[2
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机构：

[1] 广东工业大学轻工化工学院

[2] 广东省微生物研究所广东省华南应用微生物重点实验室-省部共建国家重点实验室广东省菌种保藏与应用重点实验室广东省微生物应用新技术公共实验室

来源：

现代食品科技 | 2013年 / 29卷 / 07期

关键词：

蜡样芽孢杆菌; ERIC-PCR; 分子分型; 遗传多样性分析;

D O I：

10.13982/j.mfst.1673-9078.2013.07.059

中图分类号：

TS207.4 [食品的微生物检验];

学科分类号：

083201 ;

摘要：

为建立简单快速的蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)基因间重复共有序列PCR(ERIC-PCR)的分子分型方法,该研究以B.cereusCMCC 63303的基因组DNA为模板,并采用正交设计L16(45)对影响ERIC-PCR反应体系的五个因素(模板DNA、Mg2+、dNTP、TaqDNA聚合酶、引物)在四个浓度水平上进行优化,并通过单因素试验确定最佳退火温度,最后以优化后的反应体系对50株B.cereus分离株进行ERIC-PCR分子分型和聚类分析验证其稳定性和分型效果。结果显示应用建立的ERIC-PCR反应体系对50株分离株扩增均得到了9-17条、大小在200-4000 bp之间的条带,并可将其分为47个型,且分辨力达到0.996,具有较高稳定性和分辨能力。表明ERIC-PCR技术对B.cereus分型,具有简便和分辨力高等优点,可用于食源性B.cereus分离株的多样性研究。

引用

页码：1696 / 1701

页数：6

共 8 条

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