过氧化氢诱导心肌细胞凋亡性和非凋亡性死亡的研究

目的：探讨活性氧过氧化氢（Ｈ２Ｏ２）对心肌细胞损伤作用。方法：用不同浓度的 Ｈ２Ｏ２作用于新生鼠培养心肌细胞，通过琼脂糖凝胶电泳、Ｇｉｅｍｓａ染色和流式细胞仪等方法观察Ｈ２Ｏ２对心肌细胞的凋亡性损伤作用，同时检测培养介质中乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）和丙二醛（ＭＤＡ）等生化指标的改变。结果：５ｍｍｏｌ／Ｌ　Ｈ２Ｏ２作用于培养心肌细胞６ｈ，在琼脂糖凝胶电泳上出现梯状ＤＮＡ带； Ｇｉｅｍｓａ染色细胞涂片可见到染色体浓聚或边缘化，成新月型聚集在核膜周边，并有凋亡小体的存在；流式细胞仪可检测出亚二倍体峰的出现。结论：Ｈ２Ｏ２具有浓度和时间依赖关系诱导心肌细胞的调亡，在低浓度Ｈ２Ｏ２（＜１ｍｍｏｌ／Ｌ）导致培养心肌细胞的早期生物化学改变，自由基含量升高，膜通透性增加，同时伴有少量心肌细胞调亡；而在高浓度Ｈ２Ｏ２（＞１０ｍｍｏｌ／Ｌ）时会造成培养心肌细胞的坏死性死亡，细胞膜崩塌，脂质过氧化物（ＭＤＡ）大量产生，ＬＤＨ大量泄漏，ＤＮＡ琼脂糖凝胶电泳出现弥散（ｓｍｅａｒ）泳带；５～１０ ｍｍｏｌ／Ｌ　Ｈ２Ｏ２诱导大量心肌细胞凋亡性死亡，同时伴有 ＬＤＨ和 ＭＤＡ含量升高等生物化学的改变。