TIP30基因腺病毒载体的构建及体内外抑癌作用

目的　利用缺陷型腺病毒载体表达TIP30基因 ,观察其体内外抑瘤作用。方法　用Ad EasyTM系统 ,在大肠杆菌同源重组 ,构建Ad TIP30腺病毒载体 ,经在 2 93细胞内成功包装并鉴定后 ,感染p5 3基因型不同的肝癌细胞株HepG2 (p5 3 wt)、PLC/PRL/ 5 (p5 3 mut)和骨肉瘤细胞株Saos 2 (p5 3 null)。用台盼蓝拒染法检测存活细胞 ,观察TIP30的体外抑瘤作用 ;用RT PCR方法检测HepG2 细胞p5 3基因的表达水平 ;通过裸鼠皮下肝癌移植瘤模型观察Ad TIP30的体内抑瘤效果。结果　Ad TIP30对 3种肿瘤细胞的增殖均有抑制作用 ,但对p5 3基因野生型的肝癌细胞株HepG2 抑制作用最明显。经Ad TIP30感染后 ,HepG2 细胞p5 3基因表达水平显著升高。Ad TIP30可显著抑制裸鼠皮下肿瘤的生长 ,其抑瘤率达 6 2 .8%。结论　腺病毒载体表达TIP30基因可通过p5 3基因依赖性或非依赖性途径抑制肿瘤细胞的增殖 ,是一种潜在的肿瘤生物治疗手段。