转染IL-18的骨髓基质干细胞对大鼠脑胶质瘤的作用

背景与目的:脑胶质瘤因其广泛的浸润性、免疫逃逸等生物学特性使手术、放疗、化疗等方法疗效不佳。本实验观察具有肿瘤趋向性的骨髓基质干细胞(bonemarrowstromalcells,BMSCs)转染IL-18后对大鼠脑胶质瘤的作用。方法:贴壁法培养大鼠骨髓细胞获取纯化的BMSCs,采用流式细胞术鉴定。逆转录病毒LXSN/IL-18转染BMSCs,RT-PCR、免疫荧光检测IL-18基因转录及表达情况,MTT、流式细胞术检测转染前后BMSCs细胞部分生物学特性的变化。ELISA检测BMSCs/IL-18培养上清液对大鼠淋巴细胞的激活作用。体内实验中将荷瘤鼠模型分为4组,实验Ⅰ组、实验Ⅱ组、PBS组大鼠中分别注入BMSCs细胞、BMSCs/IL-18细胞和PBS,对照组不作处理,检测BMSCs/IL-18对荷瘤鼠的作用。结果:BMSCs/IL-18可稳定转录及表达IL-18,但转染后细胞增殖速度减慢,其培养上清液可诱导大鼠淋巴细胞IFN-γ分泌量增长约9倍。脑磁共振检测显示各组肿瘤体积为:实验组Ⅰ(18.26±6.84)mm3,实验组Ⅱ(6.37±1.52)mm3,PBS组(22.48±6.02)mm3,对照组(21.06±5.83)mm3。各组大鼠存活期分别为:实验组Ⅰ(25.3±6.4)天,实验组Ⅱ(84.7±16.3)天,PBS组(21.6±4.7)天,对照组(22.5±6.2)天。荷瘤大鼠脑内移植BMSCs/IL-18后,肿瘤组织中淋巴细胞数量增多,每个200倍光镜视野中,CD4+淋巴细胞数为(37.7±3.5)个,CD8+淋巴细胞数为(32.3±4.5)个。结论:BMSCs可稳定表达转染基因,BMSCs/IL-18对大鼠胶质瘤的生长有明显抑制作用。