重组巴氏毕赤酵母高密度发酵表达rHSA

被引:13
作者
郭美锦
庄英萍
储炬
张嗣良
刘志敏
机构
[1] 华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
[2] 军事医学科学院生物工程研究所 上海
[3] 上海
[4] 北京
基金
高等学校骨干教师资助计划;
关键词
重组巴斯德毕赤酵母; 高密度发酵; 重组人血清白蛋白;
D O I
10.13343/j.cnki.wsxb.2002.01.010
中图分类号
TQ920 [一般性问题];
学科分类号
081703 ; 082203 ;
摘要
对基因工程菌Pichiapastoris的摇瓶发酵条件进行了试验 ,并根据摇瓶发酵的优化结果进行了补料分批高密度发酵。在摇瓶发酵时 ,甲醇诱导基因工程菌P .pastoris表达重组人血清白蛋白的发酵周期为 96h ;甲醇的最佳诱导浓度为 1 0g L ;发酵pH范围为 5 72~ 6 5 9;在摇瓶培养时 ,随着接种量的增加 ,虽然目的蛋白表达量缓慢增加 ,但单位细胞光密度的蛋白产率却明显下降 ,符合y =1 2 941x- 0 50 59方程 (线性相关系数r=0 9789) ,其限制性因子很可能为溶氧。在分批发酵 ,接种量为 1 0 %且种子细胞光密度 (OD60 0 )为 2 0左右时 ,细胞生长的延迟期为 2 1 1h左右 ,细胞生长光密度与培养时间的关系模型为 :y =0 7841e0 .2 3 19t(线性相关系数r=0 .993 6 ) ;在补料发酵时细胞干重浓度可达到 1 1 5g L— 1 6 0g L ,在 1 2 0h重组人血清白蛋白表达量最大达到 3 6g L。
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