麦二叉蚜体内病毒结合蛋白基因的克隆和原核表达

从麦二叉蚜体内克隆了一个DNA片段 ,经序列测定表明该片段全长为 16 4 7bp ,编码 5 4 8个氨基酸。与禾谷缢管蚜的病毒结合蛋白基因核苷酸同源性为 92 % ,氨基酸的同源性为 96 % ,从而认为这是病毒结合蛋白基因(GenBank登录号为AF4 34719)。构建了该基因的原核表达载体 pBVSG和 pETSG ,用pBVSG表达出 6 3kD的非融合目的蛋白 ,用pETSG表达出 6 9kD的融合蛋白 ,二者均有较高的表达量。以纯化的融合蛋白免疫家兔 ,制备了此病毒结合蛋白的抗血清 ,用琼脂双扩散法测定效价为 1∶5 12。