乙型肝炎病毒前S2蛋白结合蛋白基因的筛选

被引：12

作者：

陆荫英

李克

王琳

刘妍

王业东

成军

张玲霞

机构：

[1] 中国人民解放军第三○二医院传染病研究所基因治疗研究中心全军病毒性肝炎防治研究重点实验室,中国人民解放军第三○二医院传染病研究所基因治疗研究中心全军病毒性肝炎防治研究重点实验室,中国人民解放军第三○二医院传染病研究所基因治疗研究中心全军病毒性肝炎防治研究重点实验室,中国人民解放军第三○二医院传染病研究所基因治疗研究中心全军病毒性肝炎防治研究重点实验室,中国人民解放军第三○二医院传染病研究所基因治疗研究中心全军病毒性肝炎防治研究重点实验室,中国人民解放军第三○二医院传染病研究所基因治疗研究中心全军病毒性肝炎防治

来源：

中华肝脏病杂志 | 2003年 / 01期

关键词：

肝炎病毒,乙型; 基因; 前S2蛋白;

D O I：

暂无

中图分类号：

R346 [];

学科分类号：

1001 ;

摘要：

目的筛选并克隆人肝细胞中与乙型肝炎病毒前S2蛋白(HBV PreS2)相互作用的蛋白质基因。方法用聚合酶链反应(PCR)技术扩增HBV PreS2基因,连接入酵母表达载体pGBKT-7中构建诱饵质粒,转化酵母细胞AH109并在其内表达,然后与转化了人肝cDNA文库质粒的酵母细胞Y187进行配合,在营养缺陷型培养基上进行双重筛选阳性菌落,PCR从中扩增出目的片段并测序,进行生物信息学分析。结果成功克隆出HBVPreS2基因并在酵母细胞中表达,配合后选出既能在4缺(SD/-Trp-Leu-Ade-His)培养基又能在铺有X-α-半乳糖(X-α-gal)的4缺培养基上生长并变成蓝色的真阳性菌落26个,其中含金属硫蛋白A2基因的菌落有12个,细胞色素C氧化酶Ⅱ有1个,细胞色素:P450 IVF亚基2个,细胞色素C氧化酶Ⅳ亚基同功酶1有2个,人血白蛋白3个,。Na+-K+ATP酶β1亚基1个,前清蛋白2个,植物血凝素半乳糖苷结合亚基1个,未知基因2个。结论成功克隆出HBV PreS2蛋白的结合蛋白,为进一步研究HBV PreS2的作用提供了新线索。

引用

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共 2 条

[1] Characterization of neutralizing anti-pre-S1 and anti-pre-S2 (HBV) monoclonal antibodies and their fragments [J].