小片断干扰RNA抑制保罗样激酶1基因的表达诱导胃癌细胞凋亡

被引:5
作者
兰斌
刘炳亚
陈雪华
瞿颖
张晓青
蔡劬
朱正纲
机构
[1] 上海第二医科大学附属瑞金医院外科上海消化外科研究所
关键词
胃肿瘤; 保罗样激酶; RNA,小分子干扰; 细胞凋亡;
D O I
暂无
中图分类号
R735.2 [胃肿瘤];
学科分类号
100214 ;
摘要
目的观察抑制保罗样激酶基因(pololikekinase1,plk1)表达对胃癌细胞——MKN45凋亡的诱导,探讨plk1基因对胃癌细胞增殖及生存力的作用。方法化学合成小片断干扰RNA(siRNA)阻断MKN45细胞plk1基因的表达;实时定量PCR及Westernblot检测干扰前后plk1mRNA及蛋白质表达的变化;免疫荧光及激光共聚焦显微镜观察MKN45细胞微管改变,流式细胞仪检测MKN45细胞周期及凋亡的变化;Westernblot检测pro-caspase3水平的变化。结果经靶向plk1的siRNA作用后,plk1siRNAmRNA及蛋白质表达明显下降;MKN45细胞纺锤体结构变得模糊,失去完整性;较多MKN45细胞呈现G2期细胞DNA含量(P<0.05);MKN45细胞在48、72h凋亡率较对照组明显上升(P<0.05);伴随pro-caspase3水平在72h出现下降。结论抑制plk1基因表达可导致MKN45细胞凋亡,凋亡机制可能通过caspase3途径;plk1基因对胃癌细胞增殖及存活起着至关重要的作用。
引用
收藏
页码:62 / 66
页数:5
相关论文
共 1 条
[1]   PLK1在细胞周期生物学的研究进展 [J].
兰斌 ;
刘炳亚 ;
朱正纲 .
医学分子生物学杂志, 2005, (01) :65-67