PCR-SSCP技术快速检测结核分枝杆菌rpoB基因突变的研究

应用PCR -SSCP技术直接快速检测痰标本中结核分枝杆菌rpoB基因突变 ,评价此方法用于结核分枝杆菌利福平 (RFP)耐药性的意义。方法　以结核分枝杆菌H37Rv为对照、50例耐RFP(单耐和多耐 )结核分枝杆菌临床分离株、12例RFP敏感菌株、35例耐RFP肺结核患者痰标本 ,采用PCR -SSCP检测痰标本和菌株中结核杆菌rpoB基因突变。结果　 50例耐RFP菌株中有 4 5例PCR-SSCP条带与结核分枝杆菌H37Rv条带有明显差别 ,与药敏试验结果做对比 ,PCR -SSCP检测敏感性为 90 % ,特异性为 10 0 % ;12例敏感菌株与H37Rv条带一致 ,35份肺结核病人痰标本 ,2 1份痰PCR扩增阳性 ,15份SSCP图谱与H37Rv图谱有差别 ,而且PCR -SSCP 2 8份图谱与H37Rv有差别 ,阳性率为 80 %。结论　PCR -SSCP检测结核分枝杆菌rpoB基因突变快速、简便、易行 ,有望用于结核分枝杆菌RFP耐药性的快速测定 ,并将成为直接检测临床标本中结核分枝杆菌耐RFP快速方法