百脉根高频再生体系的建立及兔出血症病毒衣壳蛋白VP60基因的转化

被引:9
作者
唐广立
李传山
陈明利
张忠品
郭蔼光
机构
[1] 西北农林科技大学生命科学学院
[2] 西北农林科技大学生命科学学院 杨凌
关键词
百脉根(Lotus corniculatus Linn); 高频再生体系; 兔出血症病毒(RHDV); 转化;
D O I
暂无
中图分类号
S541.6 [];
学科分类号
摘要
以MS为基本培养基,通过调整激素种类与浓度等培养条件,按正交试验设计的原则,建立了百脉根高频再生体系。结果表明MS+2,4-D2.0mg/L+KT2.0mg/L培养基可高效诱导愈伤组织的形成,MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L培养基可高效诱导芽的分化,MS+NAA0.1mg/L培养基可快速诱导根的生成,形成再生植株。通过构建植物表达载体VP60-pBI121,研究了根癌农杆菌介导的兔出血症病毒(RHDV)衣壳蛋白VP60基因对百脉根遗传转化的影响因素,建立了百脉根快速高效遗传转化体系,结果表明,以农杆菌LBA4404为介导菌株、以下胚轴为外植体,预培养3d,在OD600为0.6的菌夜中浸染20min,共培养3d,以及300mg/L羧苄青霉素脱菌浓度和50mg/L卡那霉素筛选浓度为最佳转化条件。为利用百脉根生产动物口服型疫苗建立了技术基础。
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