亚麻RAPD-PCR体系的优化及引物的筛选

被引：3

作者：

王福亮 ^{[1
]}

黄文功 ^{[2
]}

机构：

[1] 黑龙江省农业科学院原子能研究所

[2] 黑龙江省农业科学院经济作物研究所

来源：

安徽农业科学 | 2009年 / 37卷 / 15期

关键词：

亚麻; 基因组DNA; RAPD反应; 筛选;

D O I：

10.13989/j.cnki.0517-6611.2009.15.078

中图分类号：

S563.2 [亚麻];

学科分类号：

摘要：

[目的]优化亚麻RAPD反应条件,筛选亚麻RAPD引物。[方法]DNA条带扩增采用PCR技术,条带的分离采用琼脂糖凝胶电泳法,成像利用紫外成像系统。[结果]试验优化亚麻RAPD反应条件:25μl反应体系中,含10×Buffer,Mg2+(1 mmol/L),Taq酶1U,GenomeDNA50 ng,dNTP0.25 mmol/L,RAPDprimer 1.5μmol/L。PCR反应程序为:94℃预变性4 min;94℃变性40 s,37℃退火1 min,72℃延伸90s,40个循环;72℃延伸10 min。试验利用3个有代表性的亚麻品种从70条引物中筛选出12条多态性好,重复性高的引物。[结论]该试验筛选出12条引物,并优化了亚麻RAPD反应条件,为亚麻的分子鉴定奠定了基础。

引用

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