常规方法分离纯化鸡IgG,免疫羊制备羊抗鸡IgG二抗,以辣根过氧化物酶(HRP)标记制备酶标记物的工作浓度为1:1000;选用硝酸纤维素(NC)膜作固相载体,建立检测NDV抗原的斑点间接酶联免疫吸附试验诊断方法。检测NDV鸡胚毒40份,阳性检出率100%;人工感染非免疫鸡的气管组织、肺组织各47份,检出率为93.6%;人工感染SPF鸡气管组织、肺组织各40份,检出率100%。与传染性支气管炎病毒(IBV)、减蛋综合症病毒(EDSV)、传染性法氏囊病病毒(IBDV)无交叉反应。试验显示该方法简便、特异、快速、结果直观,便于生产应用