SYBR Green I荧光RT-PCR方法检测禽流感病毒附视频

被引：13

作者：

刘丽玲 ^{[1
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姜永萍 ^{[1
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王秀荣 ^{[1
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陈化兰 ^{[1
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魏萍 ^{[2
]}

机构：

[1] 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室兽医生物技术国家重点实验室

[2] 东北农业大学

来源：

畜牧兽医学报 | 2006年 / 11期

关键词：

禽流感病毒; SYBRGreenIRT-PCR; RT-PCR; 病毒滴定; 检测;

D O I：

暂无

中图分类号：

S854.4 [兽医诊断学];

学科分类号：

0906 ;

摘要：

为建立检测禽流感病毒(AIV)的SYBR Green I荧光RT-PCR方法,根据AIV的M基因保守区的核苷酸序列设计引物。用4株不同亚型的AIV感染MDCK细胞,收集感染6、12、24、48、72 h的病毒。另外采取169份鸡的泄殖腔拭子和咽喉拭子。对上述样品的M基因进行检测,试图建立快速检测AIV的SYBR Green I荧光RT-PCR方法,并与普通RT-PCR方法和传统的病毒滴定方法进行比较。结果表明:此次建立的检测AIV的SYBRGreen I荧光RT-PCR方法能检测到感染MDCK细胞后72 h的AIV,对169份泄殖腔拭子和咽喉拭子中的AIV检出率为5.33%(9/169),而普通RT-PCR方法检出率为6.51%(11/169),病毒滴定检出率为5.62(9/160)。对其他病毒(NDVI、BDVI、BV、VA)则未检测到,且整个检测过程只需4 h,表明该方法特异、准确、快速。

引用

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页数：5