雷公藤红素对肝癌细胞株HepG2的影响及作用机制

目的研究雷公藤红素(Celastrol)对肝癌细胞株HepG2增殖活力的影响。方法将人正常肝细胞LO2及人肝癌细胞株HepG2接种在DEME培养基中,传代后取对数生长期细胞进行实验,用MTT法测定不同浓度雷公藤红素对正常肝细胞LO2及肝癌细胞株HepG 2增殖的量效关系(1、2、4、8、16、32μmol/L)和在0.5μg/mL浓度的雷公藤红素作用下的时效关系(1、2、4、8、12、24 h),Hoechst荧光染色观察凋亡细胞形态变化以及Western blot检测肝癌细胞株HepG 2中半胱氨酸蛋白酶(caspase)-3、caspase-8、caspase-9与胞内磷脂酰肌醇3激酶(p-PI3K)、t-胞内磷脂酰肌醇3激酶(t-PI3K)、磷酸化蛋白激酶(p-AKT)、t-AKT、细胞外信号调节激酶(pERK)、t-ERK的表达情况。结果经MTT法检测,不同浓度雷公藤红素对正常肝细胞的增殖没有明显抑制作用,而对肝癌细胞HepG 2的抑制率依次为6.83%、15.11%、18.32%、21.77%、23.77%、25.51%,作用强度随着浓度的升高而增强;在浓度为0.5μg/mL雷公藤红素作用下,不同时间抑制率分别为6.66%、10.63%、13.31%、15.50%、20.54%、32.34%,呈时间依赖性;Hoechst荧光染色在显微镜下均显现凋亡细胞。Western blot结果显示,caspase-3、caspase-8、caspase-9、p-PI3K、p-AKT、p-ERK显影,caspase-3、caspase-8、caspase-9表达量增加,而p-PI3K、p-AKT、p-ERK表达量降低。结论雷公藤红素通过诱导HepG 2凋亡及细胞自噬作用,发挥增殖活力抑制作用,可能与调控caspase-3、caspase-8、caspase-9、p-PI3K、p-AKT、p-ERK等相关因子的表达情况有关。