环介导逆转录等温扩增技术(RT-LAMP)在丙型肝炎病毒基因检测中的应用

被引：51

作者：

李启明 ^{[1
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马学军 ^{[1
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周蕊 ^{[1
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彭夫望 ^{[1
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高寒春 ^{[2
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匡治州 ^{[1
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侯云德 ^{[1
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机构：

[1] 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所

[2] 北京金迪克生物技术研究所

来源：

病毒学报 | 2006年 / 05期

关键词：

丙型肝炎病毒; 环介导逆转录等温扩增; 实时监控聚合酶链反应;

D O I：

10.13242/j.cnki.bingduxuebao.001743

中图分类号：

Q789 [基因工程的应用]; R373 [人体病毒学（致病病毒）];

学科分类号：

摘要：

该文介绍了一种便捷、灵敏而又特异的环介导逆转录等温扩增基因检测技术,该技术分别使用特异对应于靶序列中8个基因区段的3对特殊引物,并在反转录酶和Bst-DNA聚合酶的作用下对靶序列进行等温核酸扩增反应,整个检测反应只需1～2h。利用这种技术成功检测了丙型肝炎病毒基因,对60份经Real-time PCR或RT-PCR验证阳性的血清样品检测,阳性符合率为98%。同时,对扩增终产物进一步进行酶切分析,并与HIV、HBV和不同亚型流感病毒RNA进行交叉反应和特异性测试,均与预期结果吻合。将Real-time PCR定量后的RNA系列稀释后对检测方法的灵敏度进行了测试。结果显示,该技术的检测灵敏度在理论上可达到10个拷贝的RNA分子。以上结果证明,RT-LAMP扩增技术是一种检测程序简单、灵敏度和特异性较高的基因检测手段,在丙型肝炎病毒的快速检测方面具有一定的开发潜力。

引用

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