胆固醇氧化酶基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

被引:2
作者
银国利
张锐
郭三堆
陈毓荃
牛天贵
机构
[1] 中国农业科学院生物技术研究所
[2] 西北农林科技大学
[3] 中国农业大学 北京 西北农林科技大学
[4] 陕西杨凌
[5] 北京
[6] 北京
关键词
胆固醇氧化酶; 基因克隆; choEW; 基因表达;
D O I
暂无
中图分类号
Q78 [基因工程(遗传工程)];
学科分类号
071007 ; 0836 ; 090102 ;
摘要
采用PCR方法从来源于蒙古野驴的马红球菌(Rhodococcus equi)4-2G2菌株中分离出编码胆固醇氧化酶的新基因(choEW),其与已知的胆固醇氧化酶基因choE和choB同源性均达99%;按其推断的氨基酸序列与choE和choB相比在485位缺少一个氨基酸,分析认为choEW与choB和choE属于同一基因家族。将choEW插入到原核表达载体pET-His中,构建出重组质粒pETW,并转化Escherichia coli BL21(DE3)plysS获得工程菌。经IPTG诱导后表达出分子量约为56 kD的蛋白质,与核苷酸序列推断的蛋白大小相符。目的蛋白表达量约占细胞总蛋白的11.9%。
引用
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共 2 条
  • [1] 胆固醇氧化酶基因的克隆与表达
    季文明
    张和春
    王武
    [J]. 微生物学通报, 2000, (03) : 224 - 227
  • [2] Cholesterol oxidase: an o?static and larvicidal agent active against the cotton boll weevil,Anthonomus grandis[J] . J. T. Greenplate,N. B. Duck,J. C. Pershing,J. P. Purcell.Entomologia Experimentalis et Applicata . 1995 (3)