蚓激酶基因F238在大肠杆菌中的可溶性表达

被引:2
作者
王晓娟
黎明
高伟
赵洪坤
杜连祥
路福平
机构
[1] 天津市工业微生物重点实验室天津科技大学生物工程学院
关键词
蚓激酶; 可溶性表达; TrxA;
D O I
暂无
中图分类号
Q78 [基因工程(遗传工程)];
学科分类号
071007 ; 0836 ; 090102 ;
摘要
应用PCR技术扩增获得蚓激酶成熟肽基因F238,并将其克隆至大肠杆菌质粒pFT22bTrxA中,构建双顺反子表达载体pTrx-F238。重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),1.0mmol/LIPTG、30℃条件下诱导6h,经SDS-PAGE证实蚓激酶成熟肽蛋白获得了高效表达,所表达的蛋白产物相对分子量与预期的26kDa相符,且都是可溶性蛋白,表明分子伴侣TrxA起到了帮助目的蛋白正确折叠的作用。利用血纤维蛋白法对产物活性进行了测定,确定其不仅具有激酶作用,而且具有直接溶栓活性。最高活力可达180U/mL(尿激酶单位)。
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