用于生产rHuEPO的无血清培养基的研究

观察和筛选了适合工程细胞（Ｃ２细胞）生产重组人促红细胞生成素（ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔｈｕｍａｎｅｒｙｔｈｒｏｐｏｉｅｔｉｎ，ｒＨｕＥＰＯ）的无血清生产培养基（ＳＦＭ－ｐ）的添加成分。在ＤＭＥＭ∶Ｆ１２（１∶１）培养基中添加了Ｓｅ、乙醇胺、多种维生素、蛋白胨、胰岛素、转铁蛋白和一些细胞因子，构成了这种ＳＦＭ－ｐ。ＳＦＭ－ｐ不含牛血清白蛋白而能维持细胞生长和ｒＨｕＥＰＯ生产。在滚动瓶使用ＳＦＭ－ｐ，细胞的生长和ｒＨｕＥＰＯ的生产都与使用１％ＦＢＳ的培养基无明显区别；在填充床反应器上，用５％ＦＢＳ培养基培养Ｃ２细胞９ｄ后改换ＳＦＭ－ｐ，ＳＦＭ－ｐ能维持Ｃ２细胞在稳定生产状态下达２０ｄ。ｒＨｕＥＰＯ的产率达７１．０ｍｇ／（Ｌ·ｄ）。培养上清的ｒＨｕＥＰＯ最高含量达２８．４μｇ／ｍｌ，葡萄糖耗量达２１ｇ／（Ｌ·ｄ），细胞密度超过３．０×１０７细胞／ｍｌ。且获得的培养上清易于纯化