小鼠cAMP应答元件结合蛋白基因在大肠杆菌中的表达

被引:1
作者
余瑞元
王燕峰
孙久荣
徐长法
机构
[1] 北京大学生命科学学院!北京,北京大学生命科学学院!北京,北京大学生命科学学院!北京,北京大学生命科学学院!北京
关键词
CREB cDNA; PCR; 序列分析; 表达载体pBV220;
D O I
10.13523/j.cb.20000213
中图分类号
Q786 [基因的表达];
学科分类号
071007 ; 0836 ; 090102 ;
摘要
采用PCR技术 ,删除了小鼠CREBcDNA5′端和 3′端非编码序列 ,并引入便于基因操作的酶切位点。经 30次循环的扩增 ,得到改造后的CREBcDNA ,全长 10 71bp。亚克隆后 ,对此扩增片段进行了限制性内切酶物理图谱分析 ,测定了DNA序列 ,并以其为插入物 ,构建了 pBV2 2 0 -PCR -CREB重组表达载体。经Western印迹法分析证明 ,在大肠杆菌中的表达获得成功
引用
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