随机扩增多态DNA指纹技术的研究及在检测医院感染中的应用

目的　探讨医院感染常见病原菌的基因鉴定及分型方法 ,了解其分子流行病学情况。方法　优化了随机扩增多态 DNA指纹技术 (RAPD)的实验条件 ;利用 RAPD技术成功地检测了儿科病房呼吸道合胞病毒 (RSV)、脑外科病房铜绿假单胞菌 (PA)及血液病房白色念珠菌 (CA)的医院感染。同时进行了 RSV分离、PA菌和 CA菌培养。结果　构建了金黄色葡萄球菌 (SA )、志贺菌 (SB)、大肠埃希菌 (EC)、肠炎沙门菌 (Salm )、铜绿假单胞菌(PA)、白色念珠菌 (CA) 3、7、11型腺病毒 (Ad3、Ad7、Ad11)、呼吸道合胞病毒 (RSV)的图谱 ;用 RAPD法从 76份疑似 RSV医院感染患儿的鼻咽分泌物中分离出 4 9株 RSV,共有 4种基因型 ,R1 型占 4 4株 ,在同一疗区同一时期的 R1 3 8株。RAPD法与分离法比较阳性符合率 10 0 % ,阳性检出率高 ,P<0 .0 1;从 2名脑外科术后感染患者脑脊液及相关标本中检出 PA菌 ;从肿瘤患者化疗后感染血液中检出 CA菌。结论　 RAPD技术是检测医院感染灵敏而特异的方法