鸡胚绒毛尿囊膜检测肿瘤促血管生长作用改良技术方法

本文对鸡胚绒毛尿囊膜(Chorioallantoic membrane,CAM)测试法进行了改进,简化了某些操作程序。该法不仅适用于肿瘤促血管生成活性的研究,亦可用做检测其它促进或抑制血管生成的物质。37℃温箱孵育受精鸡卵至第九天,先在气室端钻一小孔,然后用磨切法去掉开窗区域卵壳,用无菌蒸馏水促卵壳膜与CAM分离后,剪除卵壳膜。1mm直径实体组织,可直接置于CAM的特定无血管区;被测物为液态时,需用甲基纤维素丸作载体。最后,透明胶纸封口。孵育第十一天。于CAM大静脉注入碳素墨水,剪下测试区反贴于滤纸上,10%福尔马林固定,落射光摄影,解剖镜下观察测试物周围新生毛细血管有无、密度、向测试物辐辏程度,大血管被吸引的数量以及实体组织直径增减变化,来判定测试物诱导血管生成能力。