重组毕赤酵母高密度发酵表达水蛭素过程中产物的生成和降解

被引:12
作者
周祥山
周卫斌
范卫民
张元兴
董美玉
机构
[1] 华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
[2] 华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室 上海
[3] 上海
关键词
水蛭素; 毕赤酵母; 降解;
D O I
10.13200/j.cjb.2003.01.24.zhouxsh.007
中图分类号
R346 [];
学科分类号
1001 ;
摘要
目的 研究重组毕赤酵母高密度发酵表达水蛭素过程中产物的生成和降解。方法 通过质谱和氨基酸序列分析确定水蛭素的 4种活性异构体 ,再用HPLC监测发酵过程中水蛭素的降解情况。结果 发酵过程中产生了 4种具有较高比活的水蛭素异构体 ,它们分别是目的产物水蛭素Hir6 5及Hir6 5的C 末端降解 1~ 3个氨基酸的产物。发酵时细胞干重达到 16 2g/L ,水蛭素的总活性一直在增加 ,最高为 2 .4 5× 10 4ATU/ml,相当于总产量1.8g/L。但Hir6 5在 4种水蛭素异构体总量中的比例一直在下降。Hir6 5的产量先升高再降低 ,最高为 2 80mg/L。结论 毕赤酵母发酵过程中水蛭素存在降解 ,Hir6 5降解产生了Hir6 2和Hir6 3。
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