牛传染性鼻气管炎病毒gD蛋白的截短表达与活性检测

被引:8
作者
王延辉
薛飞
朱远茂
彭伍平
机构
[1] 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室
关键词
牛传染性鼻气管炎病毒; gD糖蛋白; 原核表达; 活性检测;
D O I
暂无
中图分类号
S852.65 [家畜病毒学];
学科分类号
090601 ;
摘要
经生物学软件DNAStar分析,以牛传染性鼻气管炎病毒(Banha Nu/67)基因组DNA为模板,PCR扩增gD基因943bp的片段,将目的片段定向克隆到pET30a表达载体中,酶切及测序鉴定均正确后,转化BL21表达菌,经IPTG诱导得到部分可溶表达的重组蛋白。用Ni柱亲和层析法在非变性的条件下纯化重组蛋白,纯化的重组蛋白浓度为0.852mg/mL,纯度为85.2%。Westem blot、间接ELISA检测证明纯化的重组蛋白具有良好的抗原性和特异性。
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