目的 研究沙丁胺醇 (商品名 :舒喘灵 )对于诱导培养人气管平滑肌细胞凋亡的作用。方法 分离人气管平滑肌细胞并且在含有 10 %胎牛血清的达尔伯克改良伊格尔 (DMEM)培养基中培养 ,4～ 6代的细胞用于实验。细胞用沙丁胺醇或色满卡林 (cromakalim)或 8 溴 环磷酸腺苷 (Br Camp)培养 2 4h或 48h ,光镜和电镜观察形态学改变。琼脂糖电泳分析DNA碎片。链亲和素 过氧化物酶(SP)免疫组化染色监测p5 3、Bcl 2和Bax基因表达的改变。通过破碎DNA的原位末端标记技术(TUNEL)检测凋亡细胞的百分数。结果 (1)沙丁胺醇或 8 Br cAMP降低存活细胞的数目。在 48h、30 0 μmol/L的浓度 ,存活的细胞数量最低 ;(2 )人气管平滑肌细胞用沙丁胺醇 (10 0 μmol/L、30 0 μmol/L)孵化 48h显示出凋亡的形态学特征 (细胞皱缩、染色质浓聚 ) ;(3)琼脂糖电泳显示 ,核酸DNA断裂片呈典型的梯状条带 (大约 180～ 2 0 0bp) ;(4 )沙丁胺醇或 8 Br cAMP组p5 3或Bax基因表达显著高于对照组 ,但BCl 2组基因表达低于对照组 ;(5 )TUNEL显示 ,人气管平滑肌细胞的凋亡阳性率用 10 0、30 0μmol沙丁胺醇或 10 0 μmol 8 Br cAMP处理组与对照组比较差异有显著性 (q分别为 2 4 0 4、5 8 47、2 7 2 8,P均 <0 0 0 0 1)。但cromakalim组和先用普萘洛
