骨髓间充质干细胞的分离与培养

被引:49
作者
艾国平
粟永萍
闫国和
冉新泽
刘晓宏
罗成基
程天民
机构
[1] 第三军医大学预防医学系防原医学教研室、全军复合伤研究所!重庆
[2] 第三军医大学预防医学系防原医学教研室、全军复合伤研究所!重
关键词
骨髓间充质干细胞; 组织工程学;
D O I
10.16016/j.1000-5404.2001.05.029
中图分类号
R329.2 [人体细胞学];
学科分类号
100101 ;
摘要
目的 摸索体外分离培养骨髓间充质干细胞的最佳条件 ,并观察其部分生物学活性。方法 采用常规的细胞培养传代技术以及光、电镜技术和细胞增殖活性检测法 ,观察不同贴壁时间、不同浓度血清、不同种植密度对骨髓间充质干细胞生长、增殖、形态的影响 ,并观察培养细胞的部分生物学特性。结果 以选用 4~ 2 4h贴壁的有核细胞 ,加入 5 %~ 1 0 %胎牛血清、种植密度(4~ 8)× 1 0 4个 /ml的培养条件为最适宜细胞生长 ;在此条件下 ,培养扩增的细胞仍具有干细胞多向分化性 ;其形态呈梭状 ,具有快速增殖的能力 ;培养细胞在 3~ 4d进入对数生长期 ,随后进入平台期 ,分裂相细胞明显减少 ;光镜下细胞呈梭状或类成纤维状 ,2~1 0代的细胞呈均质状 ;超微结构显示为早期幼稚细胞形态。结论 建立了骨髓间充质干细胞体外分离、培养的条件 ,探讨了骨髓间充质干细胞部分生物学特性 ,为进一步深入研究骨髓间充质干细胞的诱导分化和应用打下基础
引用
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