含发光酶基因的转座子质粒载体的改造及向根瘤菌HN01的转座

被引：8

作者：

莫才清

周俊初

李阜棣

不详

机构：

[1] 华中农业大学生命科学院!武汉

来源：

应用与环境生物学报 | 1997年 / 03期

关键词：

发光酶基因; 大豆根瘤菌; 标记根瘤菌;

D O I：

暂无

中图分类号：

Q78 [基因工程（遗传工程）];

学科分类号：

071007 ; 0836 ; 090102 ;

摘要：

将从自杀性重组质粒pDB30上分离的3．6kb含卡那霉素抗性基因和发光酶基因（luxAB）的BglⅡ酶切片段，克隆到小Mr的高拷贝质粒pIJ2925上，构成新的质粒，pHNLX1011；然后将pHNLX1011经BglⅡ部分酶切，酶连在含蔗糖酶基因（sacB）的自杀性重组质粒载体pMH1701上，载体分别采用BglⅡ酶切和BamHⅠ酶切．连接转化后共得到4种重组质粒类型的菌株，它们具有不同发光活性；将它们分别与快生型大豆根瘤菌HN01进行三亲本杂交，发现它们的转座频率均较pDB30高．对经转座标记后的根瘤菌进行发光活性检测，只有pHNC3质粒所转座的根瘤菌浇具有较强发光活性．所得发光根瘤菌衍生菌株能在野大豆和栽培大豆黑农39根际形成正常根瘤，能用X光片记录下根瘤的发光活性．

引用

页码：252 / 257

页数：6

共 4 条

[1] 根瘤菌的标记技术及其发展 [J].

莫才清 ;

周俊初 ;

李阜棣 .

生物技术通报, 1996, (04) :4-6

[2] 细菌巨大质粒的快速检测 [J].

莫才清，李阜棣，周俊初 .

生物技术, 1996, (02) :42-43

[3] Bradyrhizobium japonicum工程菌株HN32中外源质粒pHN32增效作用的验证 [J].

莫才清 ;

张忠明 ;

沈辉 ;

周俊初 .

华中农业大学学报, 1992, (04) :364-368

[4]

Construction of a Tn 5 derivative encoding bioluminescence and its introduction in Pseudomonas, Agrobacterium and Rhizobium[J] . MGG Molecular ＆ General Genetics . 1988 (1)

← 1 →