应用三重聚合酶链反应同时检测NDV、IBV、MG的研究

本文建立了一种同时检测ＮＤＶ、ＩＢＶ和ＭＧ三种病原体的三重ＰＣＲ技术。根据ＮＤＶ、ＩＢＶ和ＭＧ的基因文库，设计了三对分别与ＮＤＶ、ＩＢＶ和ＭＧ某段基因序列互补的引物，用这三对引物对同一样品中的ＮＤＶ、 ＩＢＶ、 ＭＧ核酸模板进行多重 ＰＣＲ扩增，结果均同时得到了三条特异性大小与实验设计相符的３１０ ｂｐ（ＮＤＶ）、１７２０ ｂｐ（ＩＢＶ）和７３２ ｂｐ（ＭＧ）多重ＰＣＲ扩增带，而对其他６种禽病病原的ＰＣＲ扩增结果均为阴性；敏感性测定结果表明，该多重 ＰＣＲ技术能检出 １０ ｐｇ的 ＩＢＶ、１ｐｇ的 ＮＤＶ ＲＮＡ模板和 １ｐｇ的 ＭＧ ＤＮＡ模板。