苓桂术甘汤含药血清对TGF-β1诱导的大鼠心肌细胞株H9c2凋亡的影响

被引:17
作者
许闪 [1 ]
王靓 [1 ,2 ]
黄金玲 [1 ,2 ]
施慧 [1 ]
洪星辉 [1 ]
刘蕾 [1 ]
机构
[1] 安徽中医药大学
[2] 安徽省中医药科学院中西医结合研究所
基金
安徽省自然科学基金;
关键词
苓桂术甘汤; H9c2心肌细胞; 转化生长因子-β1; 凋亡; 半胱氨酸蛋白酶-3; 半胱氨酸蛋白酶-8;
D O I
暂无
中图分类号
R285.5 [中药实验药理];
学科分类号
100806 [中药药理学];
摘要
目的:观察苓桂术甘汤含药血清对转化生长因子-β1(Transforming growth factor,TGF-β1)诱导的大鼠心肌细胞H9c2凋亡的影响,探讨苓桂术甘汤抗心肌细胞凋亡的机制。方法 :分别用苓桂术甘汤(2.1、4.2、8.4 g/kg)大鼠含药血清(10%)与大鼠心肌细胞H9c2共培养12 h后,加入TGF-β1(20 ng/ml)继续培养12 h。用MTT法检测心肌细胞H9c2的存活率、Hoechst 33258荧光染色法观察细胞形态学变化、流式细胞术(Annexin V/PI双染色法)检测细胞凋亡率、ELISA法检测H9c2细胞半胱氨酸蛋白酶-3和半胱氨酸蛋白酶-8的表达量。结果:与正常对照组比较,TGF-β1模型组H9c2细胞存活率明显降低,细胞染色质边聚,细胞核致密浓染且固缩并呈现蓝白色,细胞凋亡率明显升高,半胱氨酸蛋白酶-3、半胱氨酸蛋白酶-8表达量明显升高;与TGF-β1模型组比较,苓桂术甘汤(4.2、8.4 g/kg)含药血清组细胞存活率均明显升高,苓桂术甘汤(2.1、4.2、8.4 g/kg)含药血清组凋亡率由(25.7±1.1)%分别下降至(22.2±1.0)%、(14.7±0.9)%和(10.1±1.3)%;苓桂术甘汤(2.1、4.2、8.4 g/kg)含药血清组半胱氨酸蛋白酶-3的表达量由(33.1±1.0)pmol/l分别明显下降至28.9±2.0、27.5±2.8和(24.2±2.3)pmol/L,苓桂术甘汤(4.2、8.4 g/kg)含药血清组半胱氨酸蛋白酶-8的表达量由(20.8±2.4)pmol/L分别明显下降至(16.4±1.3)、(13.7±0.7)pmol/L。结论:苓桂术甘汤含药血清能够明显抑制TGF-β1诱导的大鼠心肌细胞H9c2的凋亡,该作用与其抑制半胱氨酸蛋白酶-3和半胱氨酸蛋白酶-8表达有关。
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