用凝集素和非同位素标记底物测定核心α－1，6－岩藻糖转移酶及其应用

报道了一个不需同位素和ＨＰＬＣ的α－１，６－岩藻糖转移酶（α１，６ＦｕＴ，又称核心岩藻糖转移酶）的测定法，包括从正常人血浆提纯运铁蛋白，消化成带有天冬酰胺（Ａｓｎ）的二天线Ｎ－糖链，去除外端唾液酸和半乳糖后，用生物素酰胺乙酰基团标记其Ａｓｎ，并以此生物素衍生物标记的Ａｓｎ－七糖的Ｎ－糖链为受体底物，ＧＤＰ－Ｌ－岩藻糖为供体底物，用ＬＣＡ柱吸附法分离岩藻糖化后的产物，再用ＨＲｐ－Ａｖｉｄｉｎ交联物与柱上带有生物素的产物结合，此ＨＲＰ－Ａｖｉｄｉｎ－生物素。岩藻糖化产物从柱上洗脱后测定ＨＲＰ活力可代表α１，６ＦｕＴ活力。此法在较宽的范围内，产物量与酶量和反应时间成正比．人肝细胞癌、亚硝胺诱发大鼠肝癌后期或用佛波酯（ＰＭＡ）处理人肝癌细胞后，α１，６ＦｕＴ增高，而用视黄酸或ｄｂ－ｃＡＭＰ处理人肝癌细胞后，则该酶活力降低。