短双链RNA对鸡胚盘细胞外源绿荧光蛋白基因表达的影响

被引：7

作者：

孟和

陈学辉

王起山

崔芳岩

潘玉春

机构：

[1] 上海交通大学农业与生物学院,上海交通大学农业与生物学院,上海交通大学农业与生物学院,上海交通大学农业与生物学院,上海交通大学农业与生物学院上海,中国,上海,中国,上海,中国,上海,中国,上海,中国

来源：

动物学报 | 2004年 / 02期

基金：

中国博士后科学基金;

关键词：

RNAi; siRNA; 鸡胚盘细胞; GFP; GAPDH;

D O I：

暂无

中图分类号：

Q786 [基因的表达];

学科分类号：

071007 ; 0836 ; 090102 ;

摘要：

RNA干扰 (RNAinterference,RNAi)作为一种特异性沉默基因表达的方法 ,正在成为研究基因功能、胚胎发育及病毒性疾病治疗的重要工具。为了了解RNA干扰在禽类中的作用情况 ,实验将体外转录合成的绿荧光蛋白短双链干扰RNA (siGFP)和 3 磷酸甘油醛脱氢酶短双链干扰RNA (siGAPDH )分别同绿荧光蛋白(Greenfluorescentprotein ,GFP)表达载体 (pEGFP C1Vector)用脂质体转染试剂LipofectamineTM2 0 0 0共转染鸡胚盘细胞 ,并于转染后 36h在荧光显微镜下观察转染和干扰效果。对细胞绿荧光蛋白表达率的方差分析结果显示 ,不同处理组间差异达极显著水准 ,其中GFP组和GFP +siGAPDH组均同GFP +siGFP组差异极显著 ,GFP组同GFP +siGAPDH组差异不显著。实验结果说明 ,siGFP能特异、有效地敲低细胞绿荧光蛋白的表达。同线虫、真菌、拟南芥、水螅、锥虫、涡虫、果蝇、斑马鱼、小鼠等其它生物体一样 ,鸡胚盘细胞中也存在短双链干扰RNA (siRNA)特异性沉默基因表达的RNA干扰机制

引用

页码：302 / 307

页数：6

共 2 条

[1]

Specificandheritablegeneticinter ferencebydouble strandedRNAinArabidopsisthaliana .2 ChuangC,MeyerowitzEM. Proc.Natl.Acad.Sci. USA . 2000

[2]

Double-stranded RNA specifically disrupts gene-expression during planarian regeneration .2 Alvarado A S,Newmark P A. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America . 1999

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