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枇杷属植物ISSR反应体系的建立和优化
被引：29
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王永清
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四川农业大学林学园艺学院 四川农业大学林学园艺学院
邓群仙
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四川农业大学林学园艺学院 四川农业大学林学园艺学院
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阮光伦
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重庆市涪陵区果品办公室 四川农业大学林学园艺学院
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[1] 四川农业大学林学园艺学院
[2] 凯里学院环境与生命科学学院
[3] 重庆市涪陵区果品办公室
来源：
关键词：
枇杷属植物;
ISSR;
正交设计;
反应体系;
D O I：
10.13925/j.cnki.gsxb.2009.02.015
中图分类号：
S667.3 [枇杷];
学科分类号：
摘要：
首次通过正交实验,对影响枇杷属植物ISSR反应较大的Mg2+、Taq酶、dNTPs、引物、模板DNA浓度进行筛选,并对扩增反应程序进行优化。优化后的反应体系为:25μL反应体系中,含10×buffer2.5μL,Mg2+浓度2.0mmol·L-1,Taq酶1.5U,引物0.3μmol·L-1,模板DNA60ng,dNTPs0.15mmol·L-1。反应程序为94℃预变性5mim;94℃变性1mim,退火温度70s,72℃延伸1.5mim,40次循环;72℃延伸7mim,4℃保存。
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