纳豆激酶基因克隆及其在大肠杆菌中活性表达研究

被引：31

作者：

闫达中

许芳

李洁

冯建成

杨艳燕

机构：

[1] 湖北大学生命科学学院,湖北大学生命科学学院,湖北大学生命科学学院,湖北大学生命科学学院,湖北大学生命科学学院湖北武汉,湖北武汉,湖北武汉,湖北武汉,湖北武汉

来源：

湖北大学学报(自然科学版) | 2003年 / 01期

基金：

湖北省教育厅重点项目;

关键词：

纳豆激酶; 基因克隆; 大肠杆菌; 表达;

D O I：

暂无

中图分类号：

Q786 [基因的表达];

学科分类号：

071007 [遗传学];

摘要：

以纳豆芽孢杆菌基因组DNA为模板,PCR扩增了纳豆激酶基因(nattokinasegene)中编码前肽、成熟肽的核苷酸序列(pro NK),构建大肠杆菌表达质粒pTYB102,转化大肠杆菌ER2566.在IPTG诱导下,分别在15℃(14h)、30℃(3h)、37℃(2h)条件下培养,pTYB102均能表达出有活性的纳豆激酶.实验证实纳豆激酶基因得到活性表达需要Pro序列.SDS PAGE表明,15℃比30℃和37℃培养表达的杂蛋白更少.薄层扫描测定表达的纳豆激酶占菌体总蛋白的30%以上.

引用

页码：69 / 72+92 +92

页数：5