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人骨髓间充质干细胞体外培养扩增及向心肌细胞诱导分化的实验研究
被引：10
作者：
邓方阁
张秀英
曲丽梅
李玉林
机构：
[1] 吉林大学基础医学院病理生物学教育部重点实验室
来源：
关键词：
骨髓;
人骨髓间充质干细胞(hMSCs);
5-氮杂胞苷(5-Azacytidine);
心肌细胞(CM);
D O I：
暂无
中图分类号：
R329 [人体组织学];
学科分类号：
100107 [人体解剖与组织胚胎学（人体解剖学、组织与胚胎学）];
摘要：
目的:培养人骨髓间充质干细胞(Human mesenchymal stem cell,hMSCs),探讨hMSCs体外向心肌细胞(Cardio-myocytes,CM)定向诱导分化的实验研究。方法:取人的骨髓血,用Percoll(1.073g/ml)密度梯度离心及贴壁筛选结合的方法体外培养扩增hMSCs,并进行流式细胞仪分析鉴定其免疫学表型,以未加一抗只加二抗的hMSCs作为平行对照组。选用生长良好、纯度达到95%的P5代hMSCs,用不同诱导浓度的5-氮杂胞苷(5-Azacytidine)1、5、10和20μmol/L进行诱导,对诱导后的细胞进行心肌特异性标志TroponinⅠ及Desmin的免疫组化鉴定。结果:体外分离纯化培养扩增出hMSCs,其CD44阳性率平均为93.26%±2.48%,与平行对照组(3.42%±1.09%)相比有明显差异(P<0.01)。经5和10μmol/L5-Aza诱导分化的hMSCs表达心肌特异性标记TroponinⅠ、Desmin;10μmol/L5-Aza诱导分化的hMSCs阳性率明显高于5μmol/L组;在20μmol/L组中,诱导后超过50%的细胞脱落死亡。结论:hMSCs可体外分离培养扩增,并具有向心肌细胞分化的潜能,5-Aza最佳诱导浓度为10μmol/L。
引用
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页数：4
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