一氧化氮经钙信号转导途径诱导弓形虫速殖子凋亡

目的　为探讨胞浆Ca2 + 是否为一氧化氮 (NitricOxide,NO)诱导弓形虫速殖子凋亡的重要信号分子。方法　采用脱氧核苷酸末端转移酶 (TdT)介导的缺口末端标记法 (TUNEL)、琼脂糖凝胶电泳和流式细胞仪检测凋亡以及应用Fura - 2荧光负载技术测定胞浆游离钙浓度 [Ca2 + ]i。结果　NO供体亚硝基铁氰化钠 (Na2 Fe(CN) 5NO ,SNP)诱导弓形虫速殖子凋亡过程中胞浆 [Ca2 + ]i明显升高。NO清除剂 ,N -乙酰半胱氨酸能明显抑制SNP诱导的速殖子凋亡及SNP诱导的速殖子胞浆[Ca2 + ]i升高 ,而不含NO的SNP类似物 ,铁氰化钾 [K3 Fe(CN) 6]不能诱导速殖子凋亡及其胞浆 [Ca2 + ]i升高。胞外钙螯合剂EGTA ,和L型电压依赖性钙通道阻滞剂异搏定 ,完全或部分抑制SNP引起的速殖子胞浆 [Ca2 + ]i升高 ,胞内钙螯合剂BAP TA/AM及胞外钙螯合剂EGTA明显抑制SNP诱导的速殖子凋亡。结论　证明NO的供体SNP诱导弓形虫速殖子凋亡主要通过促进胞外钙内流 ,胞浆 [Ca2 + ]i升高所致。