含人DNA聚合酶β基因启动子萤光素酶报告载体的构建

被引：3

作者：

李月白 ^{[1
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张贵星 ^{[1
]}

于雅丽 ^{[2
]}

赵国强 ^{[3
]}

王欢 ^{[1
]}

董子明 ^{[4
]}

机构：

[1] 郑州大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室

[2] 郑州市骨科医院检验科

[3] 郑州大学基础医学院微生物学与免疫学教研室

[4] 郑州大学基础医学院病理生理学教研室

来源：

郑州大学学报(医学版) | 2008年 / 05期

关键词：

DNA聚合酶; 启动子; 萤光素酶报告基因;

D O I：

10.13705/j.issn.1671-6825.2008.05.060

中图分类号：

R735.1 [食管肿瘤];

学科分类号：

摘要：

目的:构建含人DNA聚合酶β(DNA polymerase beta,polβ)基因启动子的萤光素酶报告基因表达载体pGL3polβ/promoter。方法:利用PCR技术扩增人类polβ基因启动子的核心片段,克隆至含新霉素抗性的萤光素酶表达载体pGL3-Neo-enhancer,构建含DNApolβ启动子的萤光素酶表达载体pGL3polβ/promoter,重组子经双酶切、PCR及测序鉴定。将构建的载体用脂质体转染体外培养的食管癌EC-1细胞株,应用萤光素酶测定系统检测萤光素酶的表达活性。结果:测序结果表明,克隆获得的polβ基因启动子序列与GenBank报道的一致,且插入方向正确。pGL3polβ/promoter组萤光素酶的表达活性(2207348.000±71626.763)与空白组(451.670±23.347)和pGL3-Neo-enhancer组(4884.330±1623.047)相比,差异有统计学意义(F=5681.596,P<0.05)。结论:成功构建了含人DNA polβ基因启动子的萤光素酶报告基因表达载体pGL3polβ/promoter。

引用

页码：869 / 872

页数：4

共 2 条

[1] 食管正常、癌前及癌变组织中DNA聚合酶βmRNA检测 [J].

赵国强 ;

王涛 ;

赵明耀 ;

何炜 ;

杨红艳 ;

王明臣 ;

汤黎明 ;

赵继敏 ;

赵勤 ;

董子明 .

郑州大学学报(医学版), 2005, (04) :603-605

[2] 人食管癌组织DNA聚合酶β基因表达水平及定位 [J].

郑乃刚 ;

李士坤 ;

吴景兰 ;

董子明 .

郑州大学学报(医学版), 2003, (04) :501-503

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