中性红法检测巨噬细胞吞噬功能的实验条件的优化

被引：28

作者：

田维毅 ^{[1
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王文佳 ^{[1
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李海峰 ^{[1
]}

董登祥 ^{[1
]}

杨娟 ^{[2
]}

机构：

[1] 贵阳中医学院

[2] 贵州省中国科学院天然产物化学重点实验室

来源：

贵阳中医学院学报 | 2009年 / 31卷 / 02期

关键词：

巨噬细胞; 筛选模型;

D O I：

10.16588/j.cnki.issn1002-1108.2009.02.029

中图分类号：

R392-33 [免疫学技术、设备及实验方法];

学科分类号：

100102 ;

摘要：

目的:优化中性红法检测巨噬细胞(Mφ)吞噬功能的实验条件,为快速筛选Mφ吞噬功能调节成分提供更为稳定的细胞模型。方法:以小鼠腹腔Mφ吞噬中性红的能力作为模型检测指标,考察细胞收集方法、细胞浓度、贴壁孵育时间、培养时间、LPS浓度、中性红浓度、检测波长等因素对检测结果的影响,优化中性红法检测Mφ吞噬功能的实验条件。结果:本实验条件下,PBS等三种清洗液收集小鼠腹腔Mφ的效率没有显著性差异(P>0.05);Mφ贴壁孵育时间以3h为宜;Mφ加样浓度可选择在2～8×106/ml范围内;LPS在30μg/ml时达到最佳刺激效应;中性红浓度选择0.09%能够满足检测要求;加入中性红后的反应时间以3h的OD值最高:检测波长以520nm时OD值最高。结论:优化中性红法检测Mφ吞噬功能,对快速筛选Mφ吞噬功能调节成分具有实用价值。

引用

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