番鸭IFN-α基因在毕赤酵母中的分泌表达

被引:12
作者
王春霞
王林川
鄢志强
陈庆华
王政
机构
[1] 华南农业大学农业部养禽与禽病防治重点实验室,华南农业大学农业部养禽与禽病防治重点实验室,华南农业大学农业部养禽与禽病防治重点实验室,华南农业大学农业部养禽与禽病防治重点实验室,华南农业大学农业部养禽与禽病防治重点实验室广东广州,广东广州,广东广州,广东广州,广东广州
关键词
番鸭; α干扰素基因; Pichiapastoris; 分泌表达;
D O I
10.16656/j.issn.1673-4696.2003.07.014
中图分类号
S852 [兽医基础科学];
学科分类号
090604 [动物药学];
摘要
利用PCR从质粒pGEM TEasy/MDIFN扩增出番鸭IFN α基因cDNA ,将其插入到含AOX1启动子和α分泌信号肽序列的Pichiapastoris表达载体pPICZαC 3.6kb中 ,测序 ,待其结果正确后 ,将重组质粒转化至酵母X 33,PCR法筛选出Mut+ 表型的转化子置于BMMY培养基中培养。用 5mL/L甲醇诱导表达 4d后 ,经SDS PAGE分析可见 1条约 2 5ku的清晰蛋白条带。试验结果表明pPICZαC3.6kb/MDIFN质粒构建成功 ,并且实现重组酵母高效分泌表达
引用
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