银杏叶提取物对血管性痴呆大鼠学习记忆的影响及海马神经元的保护作用

目的 探讨银杏叶提取物(ginkgo biloba extracts,EGb761)对血管性痴呆(vascular dementia,VD)大鼠学习记忆的影响及海马神经元的保护作用。方法 90只大鼠随机分为假手术组、模型组和药物组,每组30只；各组大鼠分别在15 d、1月和2月共3个时间点进行测定,每个时间点10只。采用双侧夹闭颈总动脉同时腹腔注射硝普钠的方法制备VD模型,利用Morris水迷宫实验检测各组大鼠的学习记忆功能,免疫荧光实验观察海马区胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达,Western blot技术检测各组大鼠海马区P-糖蛋白(P-GP)、兴奋性氨基酸转运体2(EAAT2)、caspase-3和cleaved caspase-3蛋白的表达水平,RT-PCR技术检测P-GP和EAAT2 mRNA的表达水平。结果 与假手术组相比,模型组大鼠各时间点的水迷宫实验逃避潜伏期(escape latency,EL)显著延长[假手术组EL：15 d(15.52±3.23)s,1月(14.21±2.62)s,2月(15.37±1.66)s；模型组EL：15 d(30.35±2.30)s,1月(40.78±3.55)s, 2月(33.88±1.47)s；均P<0.01),药物组大鼠各时间点的EL均明显短于模型组[药物组EL：15 d (25.69±2.44)s,1月(20.78±1.72)s,2月(18.23±1.67)s；均P<0.01]。免疫荧光显示,药物组各时间点GFAP的表达较模型组减少(P<0.01)；Western blot结果显示,药物组各时间点cleaved caspase-3蛋白的表达显著低于模型组(P<0.01)。Western blot和RT-PCR结果共同显示,药物组15 d和1月时间点P-GP和EAAT2蛋白表达水平和mRNA的表达水平较模型组明显增大(P<0.01),2月时间点较模型组表达降低(P<0.01)。结论 EGb761能改善VD大鼠的学习记忆能力,并通过调节不同时间点VD大鼠海马区P-GP和EAAT2蛋白及mRNA的表达(1月时间点内上调,至2月时间点下调),下调各时间点cleaved-caspase-3和GFAP的表达,延缓VD大鼠脑损伤,对神经细胞起到保护作用。