荧光实时定量PCR检测单核李斯特菌方法学建立及应用

被引：9

作者：

孙晞

吴建中

张宁

欧仕益

唐书泽

机构：

[1] 暨南大学食品系

[2] 暨南大学食品系广东　广州　

[3] 广东　广州　

[4] 广东　广州　

来源：

实用预防医学 | 2005年 / 03期

关键词：

荧光实时定量PCR; 单核细胞增多性李斯特菌;

D O I：

暂无

中图分类号：

R155.5 [食品卫生与检验];

学科分类号：

摘要：

目的建立检测单核细胞增多性李斯特菌的荧光定量PCR方法,并利用此方法检测人工污染的牛奶中单增李斯特菌菌量。方法选择单增李斯特菌特异性的基因ListeriolysinO基因为靶目标设计引物,采用煮沸法抽提纯单增李斯特菌株(1/2a)DNA,建立SYBRGREEN实时定量PCR检测体系。结果定量PCR对李斯特菌可产生特异扩增信号,对其他菌(大肠杆菌)无响应。标准曲线的相关系数为0.9521。最小检菌量约为100个菌落形成单位/反应体系。在人为污染牛奶检测中,与传统细菌计数方法结果相比,相关系数为0.839。结论实时定量PCR是一种快速、灵敏的定量检测单增李斯特菌的方法,可用于牛奶样品的检测。

引用

页码：496 / 497

页数：2

共 4 条

[1] Application of a molecular beacon- realtime PCR technology to detect Salmonella species contaminating fruit and vegetables. Liming SH,Bhagwat AA. Int. J. Food Micro . 2004
[2] A PCR protocol using inl gene as a target for specific detection of Listeria monocytogenes. Almeida PF,Almeida RCC. Food Control . 2000
[3] Polymerase chain reaction detection of Listeria monocytogenes using oligonucleotide primers targeting actA gene. Zhou XH,Jiao XN. Food Control . 2005
[4] Development of a PCR-based assay to detect Shiga toxin-producing Escherichia coli, Listeria monocytogenes,and Salmonella in milk. Aslam M,Hogan J,Smith KL. Food Microbiology . 2003

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