PCR直接测序法分析结核分枝杆菌katG基因突变

为了了解我国结核分枝杆菌耐异烟肼 (INH)分离株katG基因突变情况 ,研究其临床意义。本研究通过聚合酶链反应 (PCR)、PCR 单链构象多态性 (SSCP)和PCR直接测序法 (directsequencing ,DS)分析 92株结核分枝杆菌临床分离株的katG基因。以H37Rv标准株为对照 ,2 3株药物敏感株中 ,2 1株katG基因SSCP分析正常 ,2株异常。 36株耐非INH药物的分离株中 ,2 0株katG基因SSCP正常 ,16株异常。 33株耐INH分离株中 ,高度耐INH的 17株 ,其中 4株为katG基因缺失 ,5株katGSSCP异常 ,8株正常 ;低度耐INH的 16株 ,其中 13株KatG基因SSCP异常 ,3株正常。上述所有katGSSCP异常的分离株DS分析均为 315位密码子突变 ,除 1株为AGC→AAC突变外 ,其余均为AGC→ACC突变。结果表明katG基因突变是结核分枝杆菌耐INH产生的主要分子机制 ,其最常见的 315位密码子突变可引起结核分枝杆菌轻度或中度耐INH。