正常人肝细胞cDNA文库的构建及应用分析

被引：2

作者：

栾慎顺 ^{[1
]}

张敬武 ^{[2
]}

刘恒贵 ^{[3
]}

机构：

[1] 沈阳农业大学

[2] 沈阳药科大学

[3] 中国科学院微生物研究所

来源：

生物技术通报 | 2007年 / 06期

关键词：

cDNA文库; 肝; 乙肝病毒;

D O I：

10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2007.06.036

中图分类号：

R346 [];

学科分类号：

摘要：

目的利用Gubler-Hoffman法构建了正常人肝细胞的cDNA文库以筛选肝细胞内部与乙肝病毒感染相关的基因。方法首先采用TRIzol法提取正常人肝细胞总RNA,纯化mRNA。逆转录合成单链cDNA,然后合成双链cDNA。用Spin Column回收0.4kb以上片段,然后与Vector pAP3neo进行连接,利用电刺激转化法导入E.coliDH10B,利用PCR法检测文库的重组效率。结果扩增后的文库重组率为93.3%。结论已经成功地构建了正常人肝组织的cDNA文库,该文库可用于筛选与乙肝相关的基因及用于基因芯片的制作。

引用

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