一种水稻幼苗单株DNA的快速提取及PAGE银染改良法

被引：10

作者：

陈罡 ^{[1
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钟鸣 ^{[1
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徐正进 ^{[2
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张丽 ^{[1
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刘少霞 ^{[1
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李敏 ^{[1
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机构：

[1] 沈阳农业大学辽宁省农业生物技术重点实验室

[2] 沈阳农业大学水稻研究所

来源：

生物技术通讯 | 2006年 / 02期

关键词：

水稻; DNA提取; SSR; 聚丙烯酰胺凝胶电泳; 银染;

D O I：

暂无

中图分类号：

S511 [稻];

学科分类号：

090104 [作物信息科学与技术];

摘要：

目的:为了提高SSR分子标记技术在水稻遗传育种中的研究效率,介绍一种快速的适于SSR-PCR扩增的水稻幼苗单株DNA提取法及PAGE银染法。方法:在常温下加入少量SDS提取液将单株叶片迅速捣碎,再加入300μLSDS提取液,65℃水浴10min后离心,取上清用乙醇沉淀后离心,超净工作台吹干后用100μLTE回溶即可。改进的PAGE银染法只需染色、冲洗、显影等3步,用乙醇和硝酸银作为染色液,去离子水快速冲洗1次后置显影液中即可显影。结果:本法可快速提取DNA,不须液氮研磨、氯仿抽提,提取的DNA经0.8%琼脂糖凝胶电泳检测表明质量较好,且扩增结果稳定可靠,满足了SSR-PCR的需要。改良的银染法与常规银染法的检出结果相同,但快速方便,整个过程只需10min,且背景较浅,灵敏度高。结论:快速提取法及PAGE银染改良法结合SSR分子标记技术,可有效地用于杂种后代的遗传连锁分析和分子标记辅助育种时的单株检测。

引用

页码：213 / 215

页数：3

共 7 条

[1]

Development of microsatellite markers and characterization of simple sequence length polymorphism (SSLP) in rice (Oryza sativa L) [J].