不同保存方法对光皮桦总DNA提取效果的影响

被引:19
作者
李志真 [1 ]
谢一青 [1 ]
黄儒珠 [2 ]
黄勇 [1 ]
陈杰 [1 ]
机构
[1] 福建省林业科学研究院
[2] 福建师范大学生物工程学院
关键词
光皮桦; 保存方法; DNA提取; PCR;
D O I
暂无
中图分类号
S792.159 [其他];
学科分类号
0829 ; 0907 ;
摘要
光皮桦是一种顽拗类植物,其鲜叶组织中富含酚类、糖类及其他次生代谢物。这些物质很容易使鲜叶发生褐变,从而严重影响植物基因组DNA的提取质量。本文以新鲜嫩叶为对照,比较了-20℃冷藏、硅胶干燥、改进的饱和NaCl-CTAB溶液保存和核分离缓冲液固定4种鲜叶保存方法对提取光皮桦基因组总DNA效果的影响,寻找最佳的光皮桦嫩叶保存方法。并以提取的核酸得率、纯度、片段分布情况、是否含有PCR反应抑制剂等指标来评价其保存效果。结果表明:-20℃冷藏的样品未能提到DNA;新鲜样品、改进的饱和NaCl-CTAB溶液保存和核分离缓冲液保存的样品均提到纯度较好的DNA,大小在48Kb左右,得率为400!g/g鲜叶左右,并获得条带清晰、多态性好的PCR扩增图谱;用硅胶干燥保存的样品也能提到DNA,但得率低,为51.2!g/g鲜叶,且未获得条带完整、清晰的PCR扩增图谱。
引用
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