高糖和胰岛素对肾小球系膜细胞葡萄糖转运蛋白4表达及易位的影响

目的观察高糖和胰岛素对体外培养的肾小球系膜细胞(GMC)葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)的影响以及胰岛素引起GLUT4易位的情况,探讨GLUT4在糖尿病肾病(DN)发生发展机制中的作用。方法将体外培养的鼠1097系膜细胞分为8组:对照组、生理浓度胰岛素组(10-9 mol/L)、低浓度胰岛素组(10-8 mol/L)、高浓度胰岛素组(10-6 mol/L)、高糖组(30 mmol/L)、甘露醇组、高糖加高浓度胰岛素组和高糖加生理浓度胰岛素组。RT-PCR检测GLUT4 mRNA表达;共聚焦显微镜观察各组GLUT4蛋白表达,以及胰岛素引起GMC GLUT4易位的剂量-时间效应。结果胰岛素可增加GLUT4的表达,高糖使GLUT4表达明显下降。胰岛素可引起系膜细胞GLUT4易位。低浓度胰岛素组、高浓度胰岛素组细胞GLUT4均在加入胰岛素15 min后达到最大易位,且以后的45 min胞膜上的GLUT4的荧光强度与15 min时差异无统计学意义(P>0.05)。结论不同浓度的胰岛素均可刺激系膜细胞GLUT4易位,且过程是相似的。高糖明显抑制GLUT4在系膜细胞上的表达。胰岛素可部分拮抗高糖导致的GLUT4下调,且呈剂量依赖性。