转基因成分实时荧光PCR定量分析数学方程的理论研究

目的:根据TaqMan荧光探针实时荧光PCR的技术原理,建立实时荧光PCR循环次数与荧光强度间的动力学方程、样品中转基因成分含量与X0及CT的定量关系和定量分析数学方程。方法:采用数学推导和理论测算的方法,研究数学方程中各参数的意义、影响因素、变化特点和规律。结果:转基因成分含量的定义、定量分析模式、样品DNA提取效率、PCR扩增效率、反应管中初始模板数、荧光分子形成效率、荧光测量阈值、PCR测量的系统和偶然误差,是导致定量关系发生偏离及测定灵敏度发生变化的重要原因。结论:数学方程中各项参数可用于评估定量关系的偏离程度及变化趋势,还可作为选择、优化定量分析条件和校正、降低定量方法系统误差的技术指标。