表皮生长因子介导的基因转移载体蛋白的制备

被引：5

作者：

方华圣

张琳

卢圣栋

张树政

机构：

[1] DepartmentofBiology,ZhengzhouUniversity,中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所分子生物学国家重点实验室,中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所分子生物学国家重点实验室,InstituteofMicrobiology,ChineseAcademyofSciencesZhengzhou,

来源：

中国医学科学院学报 | 2002年 / 04期

关键词：

表皮生长因子受体; 靶向基因载体;

D O I：

暂无

中图分类号：

R346 [];

学科分类号：

摘要：

目的制备一种表皮生长因子(EGF)受体介导的、完全非病毒基因转移载体。方法通过PCR分别扩增出人类组蛋白第一功能域(H1)基因的编码序列和EGF的受体结合结构域(C环)基因的编码序列:将它们以EcoRⅠ位点连接后作为模板,PCR扩增出融合蛋白H1EGFc的基因。在对此融合基因进行克隆、测序之后,构建原核表达载体PLYI-H1EGFc,并转化大肠杆菌DH5α进行诱导表达。将表达出的融合蛋白利用SDS-PAGE电泳凝胶切割法进行纯化。结果表达出的目的蛋白与设计的融合蛋白分子量相符;经SDS-PAGE扫描,纯化后的目的蛋白纯度达94.02%。结论表达并纯化了融合蛋白H1EGFc。

引用

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